小鼠活体成像

荧光素酶标记试剂盒 荧光素酶（Luciferase）标记细胞、或选用已标记的细胞系

一. 试剂盒说明

荧光素酶（Luciferase）是自然界中能够产生生物荧光的酶的统称，其中最有代表性的是来自北美萤火虫（Photinus pyralis）体内的荧光素酶。萤火虫荧光素酶属于加氧酶（oxygenase），其发光反应需要O2和Mg2+参与；有辅酶A（CoA）存在时能提高反应效率，增加发光时间。萤火虫荧光素酶无需翻译后修饰，即可表现出荧光素酶活性。本产品将萤火虫荧光素酶的基因插入慢病毒介导的载体中，通过CAG启动子过表达从而作为报告基因，在细胞中表达。常用于细胞标记后小动物细胞移植活体成像追踪，从而评估移植后细胞的归巢以及治疗效果等。

二.试剂盒组份

三. 注意事项

萤光素酶标记液避免反复冻融，操作时要戴手套和口罩。该产品仅限于非临床性科研使用。

四. 操作步骤

细胞传代培养到6孔板或者6cm盘中12-16小时后，将萤光素酶标记液0.3ml（6孔板）或者0.5ml（6cm盘）分别与新鲜细胞培养液混匀，比例为0.3ml萤光素酶标记液中加入0.7ml新鲜培养液和1.0μl polybrene（终浓度8ng/ml），0.5ml萤光素酶标记液中加入1.5ml新鲜培养液和2μl polybrean（终浓度8ng/ml）。预混好的萤光素酶标记液加入到目的细胞培养皿中，此时细胞密度不宜超过60%。2个小时之内每间隔15-30min轻轻晃动被标记的细胞培养皿，可以达到更好的标记效果，2小时之后培养皿中补充等体积的新鲜培养液，过夜培养后更换成新鲜培养液。48h之后，利用Progema公司生产的萤光素酶检测试剂盒（货号：E1960）检测标记效果。

小动物活体成像萤光素酶|D-荧光素钾盐发光底物

D-Luciferin,Sodium Salt D-荧光素钠盐

吉满生物也卖荧光素盐，价格便宜

Dulbecco's磷酸盐缓冲液(DPBS)，不含钙、镁、酚红

‍

150mg/kg=0.15mg/g荧光试剂注入小鼠体内，小鼠20g，需20g×0.15mg/g=3mg/只，15mg/ml的储存液，需要3mg/只 / 15mg/ml = 0.2ml/只=200μl/只，20只需要4ml

‍